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Ich bin eins sdzfeaw eahfea seag wt4 wg 4w4t sggwrgr srgrg gg sr

Methodik

Animal models dominated the field of pain research for the last few decades. With technological progress more options are becoming available for pain models independent of animals. While the patch clamp technique is capable of electrophysiological characterisation of single cells, Multi Electrode Arrays (MEAs) have been developed for simultaneous long-term measurements of multiple neurons. Additionally, as sensory neurons are not accessible in vivo, differentiation of human induced pluripotent stem cells (hiPSC) holds the possibility of unlimited neuron generation while maintaining the donor genotype. We compared cells derived from a healthy control with cells derived from a Fabry disease patient.
Therefore, we focused on two main goals. First, sensory neuron subtypes generated by iPSC differentiation had to be characterized using different neuron subtype specific markers. Results showed expression of different neuron specific markers confirming their differentiation. Expression of TRKB and TRKC revealed the presence of mechanoreceptors and proprioceptors, while the markers Substance P, Nociceptin, Nav1.7, Nav1.8, Nav1.9 and different types of TRP channels indicate an abundance of nociceptor subtypes.
Furthermore, the MEA technology for electrophysiological characterisation of said neurons was established. Testing different cultivation options revealed optimal cell densities, passaging age and survival duration of differentiated sensory neurons on the MEA plate. Additionally, thermal and electrical Stimulation protocols were used. Thermal Stimulation with 37°C and 42°C showed elevated spiking activities in both cell lines. An optimal protocol for electrical stimulation was established. While both, a control cell line and a cell line derived from a patient diagnosed with Fabry disease have been measured, to directly compare characteristics of both cell lines they will have to be cultured together on one MEA plate in future experiments. Different floxuridine treatment options did not result in purer sensory neuron cultures.
With this thesis the basis for electrophysiological characterization of control and patient derived sensory neurons was built. Further research is needed to confirm the results gained here. Also, testing the influence of different drugs and substances directly on the MEA plates is required. Using these results, patient specific treatment options using iPSC derived sensory neurons on MEA plates become available.

Erfahrungen

Animal models dominated the field of pain research for the last few decades. With technological progress more options are becoming available for pain models independent of animals. While the patch clamp technique is capable of electrophysiological characterisation of single cells, Multi Electrode Arrays (MEAs) have been developed for simultaneous long-term measurements of multiple neurons. Additionally, as sensory neurons are not accessible in vivo, differentiation of human induced pluripotent stem cells (hiPSC) holds the possibility of unlimited neuron generation while maintaining the donor genotype. We compared cells derived from a healthy control with cells derived from a Fabry disease patient.
Therefore, we focused on two main goals. First, sensory neuron subtypes generated by iPSC differentiation had to be characterized using different neuron subtype specific markers. Results showed expression of different neuron specific markers confirming their differentiation. Expression of TRKB and TRKC revealed the presence of mechanoreceptors and proprioceptors, while the markers Substance P, Nociceptin, Nav1.7, Nav1.8, Nav1.9 and different types of TRP channels indicate an abundance of nociceptor subtypes.
Furthermore, the MEA technology for electrophysiological characterisation of said neurons was established. Testing different cultivation options revealed optimal cell densities, passaging age and survival duration of differentiated sensory neurons on the MEA plate. Additionally, thermal and electrical Stimulation protocols were used. Thermal Stimulation with 37°C and 42°C showed elevated spiking activities in both cell lines. An optimal protocol for electrical stimulation was established. While both, a control cell line and a cell line derived from a patient diagnosed with Fabry disease have been measured, to directly compare characteristics of both cell lines they will have to be cultured together on one MEA plate in future experiments. Different floxuridine treatment options did not result in purer sensory neuron cultures.
With this thesis the basis for electrophysiological characterization of control and patient derived sensory neurons was built. Further research is needed to confirm the results gained here. Also, testing the influence of different drugs and substances directly on the MEA plates is required. Using these results, patient specific treatment options using iPSC derived sensory neurons on MEA plates become available.

Preise

Preis für Online-Unterricht per Webcam : 43CHF/h
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